產品更新-人肺癌細胞

用途：A549能通過胞苷二磷脂酰膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂；角蛋白陽性。
形(xing)態：上皮(pi)細胞樣，短梭形(xing)，邊緣不規(gui)則，單層貼(tie)壁生長，背(bei)景干(gan)凈(jing)

傳代方法 復蘇(su)步驟：①凍存(cun)管(guan)從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅(xun)速沒入37℃水浴鍋，搖晃凍存(cun)管(guan)加(jia)速溶解(jie)(jie)，以1min內(nei)(nei)全(quan)部溶解(jie)(jie)為(wei)宜；②在超(chao)凈(jing)臺(tai)中將(jiang)溶解(jie)(jie)好的(de)細胞(bao)(bao)液加(jia)入到裝有9mL完(wan)-全(quan)培養(yang)基(ji)的(de)離心管(guan)內(nei)(nei)，1000-1200rpm離心5min，棄去上(shang)清液，用1-2mL完(wan)-全(quan)培養(yang)基(ji)重懸細胞(bao)(bao)。③將(jiang)細胞(bao)(bao)懸液加(jia)入到含有5-6mL完(wan)-全(quan)培養(yang)基(ji)的(de)T25瓶(ping)中，放入培養(yang)箱培養(yang)。

細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)傳代(dai)：①將(jiang)舊培養(yang)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入(ru)1-2mL胰(yi)(yi)酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察(cha)消(xiao)化(hua)(hua)情(qing)況，在細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)邊(bian)緣縮小，貼壁(bi)松動時（可用吸管吸起些許(xu)胰(yi)(yi)酶輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)層(ceng)某(mou)處，肉眼可見細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)層(ceng)脫落(luo)，即消(xiao)化(hua)(hua)完(wan)成，否(fou)則(ze)繼續消(xiao)化(hua)(hua)），直接吸掉胰(yi)(yi)酶，加入(ru)5-6mL完(wan)-全培養(yang)基(ji)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)層(ceng)，把細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)層(ceng)吹(chui)落(luo)，吹(chui)散(san)。③將(jiang)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸液按1:2比例分到新的T25瓶(ping)中，添加適(shi)當的完(wan)-全培養(yang)基(ji)，把細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸液打勻，于培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)。；④注意培養(yang)基(ji)pH值變化(hua)(hua)和(he)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)密(mi)(mi)度，定期換液（每周(zhou)2-3次），待細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)密(mi)(mi)度達(da)到80%-90%時，重(zhong)復傳代(dai)操作或者凍存。

生長條件 培養溫度37℃；氣體環境5%CO2+95%空氣；
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
安全等級 1
形態 上皮細胞樣，短梭形，邊緣不規則，單層貼壁生長，背景干凈
應用領域 A549能通過胞苷二磷脂酰膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂；角蛋白陽性。