產品更新-人臍靜脈內皮細胞
形(xing)態(tai):內皮細胞,短梭形(xing),不規則(ze)形(xing),邊緣不規則(ze),單(dan)層貼壁生長
培養基 HUVEC細(xi)胞(bao)專(zhuan)用培養基:500mlECM+50mlFBS+5mlECGS+5mlP/S
傳代方法 復蘇步驟:①凍(dong)存管(guan)從液(ye)氮或-80℃冰(bing)箱中(zhong)取出放入PE手套中(zhong),迅速沒入37℃水浴鍋(guo),搖晃凍(dong)存管(guan)加(jia)速溶解(jie),以1min內(nei)全(quan)部溶解(jie)為宜;②在超凈臺中(zhong)將(jiang)溶解(jie)好的(de)(de)細胞液(ye)加(jia)入到(dao)裝有(you)9mL完(wan)-全(quan)培(pei)養基的(de)(de)離(li)心管(guan)內(nei),1000-1200rpm離(li)心5min,棄去上(shang)清液(ye),用1-2mL完(wan)-全(quan)培(pei)養基重懸(xuan)細胞。③將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入到(dao)含有(you)5-6mL完(wan)-全(quan)培(pei)養基的(de)(de)T25瓶中(zhong),放入培(pei)養箱培(pei)養。
細(xi)(xi)胞(bao)傳代:①將舊(jiu)培養(yang)液吸(xi)除,PBS清洗兩遍后(hou),加(jia)入1-2mL胰(yi)酶(mei)(mei)替代物;②鏡下觀察(cha)消化(hua)(hua)情況,在細(xi)(xi)胞(bao)邊(bian)緣縮小,貼壁松(song)動時(可用吸(xi)管吸(xi)起些許胰(yi)酶(mei)(mei)替代物輕輕吹(chui)打細(xi)(xi)胞(bao)層某處,肉眼可見細(xi)(xi)胞(bao)層脫落,即消化(hua)(hua)完成,否則繼(ji)續(xu)消化(hua)(hua)),直(zhi)接(jie)吸(xi)掉胰(yi)酶(mei)(mei)替代物,加(jia)入5-6mL完-全培養(yang)基,輕輕吹(chui)打細(xi)(xi)胞(bao)層,把細(xi)(xi)胞(bao)層吹(chui)落,吹(chui)散(san)。③將細(xi)(xi)胞(bao)懸液按1:2比例分(fen)到(dao)新的(de)(de)T25瓶中,添加(jia)適當的(de)(de)完-全培養(yang)基,把細(xi)(xi)胞(bao)懸液打勻,于培養(yang)箱中培養(yang)。;④注意(yi)培養(yang)基pH值變化(hua)(hua)和細(xi)(xi)胞(bao)密(mi)(mi)度,定期換液(每周2-3次),待細(xi)(xi)胞(bao)密(mi)(mi)度達到(dao)80%-90%時,重復傳代操作或(huo)者凍存。
生長條件 37℃;5%CO2+95%空氣;
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
安全等級 1
形態 內皮細胞,短梭形,不規則形,邊緣不規則,單層貼壁生長