僅供科研-小鼠結腸癌細胞

培養基 RPMI-1640完(wan)-全培養基：90%RPMI-1640+10%FBS

傳(chuan)代方法 復蘇(su)步驟：①凍(dong)存管(guan)從液(ye)(ye)(ye)氮或-80℃冰箱中(zhong)取出放入PE手套中(zhong)，迅速沒入37℃水浴鍋，搖晃凍(dong)存管(guan)加速溶(rong)解(jie)，以1min內全(quan)部溶(rong)解(jie)為宜；②在超凈臺中(zhong)將(jiang)溶(rong)解(jie)好的細(xi)胞(bao)(bao)液(ye)(ye)(ye)加入到裝有9mL完-全(quan)培(pei)養基(ji)的離心(xin)管(guan)內，1000-1200rpm離心(xin)5min，棄去上清(qing)液(ye)(ye)(ye)，用1-2mL完-全(quan)培(pei)養基(ji)重懸(xuan)細(xi)胞(bao)(bao)。③將(jiang)細(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液(ye)(ye)(ye)加入到含有5-6mL完-全(quan)培(pei)養基(ji)的T25瓶(ping)中(zhong)，放入培(pei)養箱培(pei)養。

細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)傳代(dai)：①將(jiang)舊培(pei)(pei)養液(ye)(ye)吸(xi)除，PBS清洗兩遍(bian)后，加入(ru)1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀(guan)察(cha)消(xiao)化(hua)情況，在細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)邊(bian)緣縮小，貼壁(bi)松動時(shi)（可(ke)用吸(xi)管吸(xi)起些(xie)許胰酶輕(qing)輕(qing)吹打細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)層某處，肉(rou)眼可(ke)見細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)層脫落(luo)，即消(xiao)化(hua)完(wan)成，否則(ze)繼續消(xiao)化(hua)），直接吸(xi)掉(diao)胰酶，加入(ru)5-6mL完(wan)-全培(pei)(pei)養基，輕(qing)輕(qing)吹打細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)層，把細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)層吹落(luo)，吹散。③將(jiang)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸液(ye)(ye)按1:2比例分到新(xin)的T25瓶中，添(tian)加適(shi)當的完(wan)-全培(pei)(pei)養基，把細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸液(ye)(ye)打勻(yun)，于培(pei)(pei)養箱中培(pei)(pei)養。；④注意培(pei)(pei)養基pH值(zhi)變化(hua)和細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)密(mi)度(du)，定期(qi)換液(ye)(ye)（每周2-3次），待細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)密(mi)度(du)達(da)到80%-90%時(shi)，重復傳代(dai)操作(zuo)或者凍存。

生長條件 37℃；5%CO2+95%空氣；
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
類型 貼壁生長
安全等級 1
形態 上皮細胞樣，突觸型，邊緣不規則，單層貼壁生長
分離基物 結(jie)腸癌；雌性；C57BL/6